一分鐘帶你了解SRB檢測試劑盒

 

　　SRB是一種厭氧的微生物。廣泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油氣井等缺氧環境中。雖然從理論上講，SRB為嚴格的厭氧菌，但隨著研究的深入，已有研究結果表明SRB并非嚴格意義上的厭氧，而是兼性厭氧。

 

　　但總體上來說，SRB對氧還是極其敏感的，因此對其培養與分離關鍵要采用嚴格的厭氧技術培養SRB不僅僅要求周圍生長的環境是無氧的，還有培養基中氧化還原電位必須在-100mV以下。

 

　　所以通常在培養基中加入一些強還原劑，如巰基乙醇、抗壞血酸、L2半胱氨酸鹽酸鹽，這些物質受熱容易分解，所以要采用過濾除菌的方法單獨滅菌。

 

　　SRB檢測試劑盒的檢測原理：

 

　　SRB檢測試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗，往預先包被SRB捕獲抗體的包被微孔中，依次加入檢測抗體，經過溫育并*的清洗。用底物TMB著色，TMB會在過氧化物酶的作用下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SRB呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度，計算樣品濃度。

 

　　SRB檢測試劑盒的樣品收集、保存方法及處理辦法：

 

　　1、血清：采用的是不含內毒素和熱原的試管，操作過程中要注意不能受到任何細胞刺激，收集血液后，使用離心機3000轉功率10分鐘將血清和紅細胞小心且迅速地分離。

 

　　2、血漿：EDTA、肝素抗凝和檸檬酸鹽。使用離心機3000轉功率工作30分鐘后取上清。

 

　　3、細胞上清液：使用離心機3000轉功率工作10分鐘去除聚合物和顆粒。

 

　　4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。使用離心機3000轉功率工作10分鐘取上清。

 

　　5、保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分開手機保存，存放于-20℃的環境之中，避免反復凍融，在室溫下進行解凍樣品。

 

　　SRB檢測試劑盒操作的注意事項：

 

　　1、SRB檢測試劑盒要保存在2-8℃的環境當中，使用前在室溫下放置20分鐘。從冰箱取出之后，濃縮洗滌液會出現結晶，這是正常的現象，需要等到水浴加熱使結晶*溶解后使用。

 

　　2、實驗中不用的板條要馬上放回自封袋中，密封儲存。

 

　　3、經過預處理后的樣本不需要再進行稀釋，直接取10μL加樣即可。

 

　　4、嚴格按照說明書中的加液量、時間進行溫育操作。

 

　　5、所有液體組分使用前要進行充分的搖勻。